ICS07.080 CCSA40 中华人民共和国国家标准 GB/T40980—2026 代替GB/T40980—2021 生化制品中还原糖的测定 Determinationofreducingsugarsinbiochemicalproducts 2026-03-31发布 2026-10-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布目 次 前言 Ⅲ ………………………………………………………………………………………………………… 1 范围 1 ……………………………………………………………………………………………………… 2 规范性引用文件 1 ………………………………………………………………………………………… 3 术语和定义 1 ……………………………………………………………………………………………… 4 柱前衍生高效液相色谱法 1 ……………………………………………………………………………… 5 离子色谱法 5 ……………………………………………………………………………………………… 附录A(资料性) 10种还原糖化合物信息表 8 …………………………………………………………… 附录B(资料性) 10种还原糖标准样品/标准物质色谱图 9 ……………………………………………… ⅠGB/T40980—2026前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替GB/T40980—2021《生化制品中还原糖的测定 柱前衍生高效液相色谱法》。与 GB/T40980—2021相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下: ———更改了标准的适用范围:删除静脉注射用人免疫球蛋白、狂犬病人免疫球蛋白(见第1章,2021 年版的第1章); ———增加了“试剂或材料”中试剂使用安全提示(见4.2,2021年版的第5章); ———更改“分析步骤”为“试验步骤”(见4.4,2021年版的第7章); ———更改了试样前处理:删除“固体试样前处理”,将“含油脂及蛋白类液体试样前处理”更改为“含 油脂和蛋白类试样”,将“不含油脂及蛋白类液体试样前处理”更改为“不含油脂和蛋白类试样” (见4.4.2.1、4.4.2.2,2021年版的7.2.1、7.2.2、7.2.3); ———更改试样中“还原糖含量”为“还原糖质量分数”,“X”为“ωa”,“微克每毫升(μg/mL)”为“毫克 每升(mg/L)”,删除“K”(见4.5,2021年版的第8章); ———更改“检出限”“定量限”单位“μg/mL”为“mg/100g”(见4.7表2,2021年版的第10章表2); ———更改“分析结果计算与表示”为“试验数据处理”(见4.5,2021年版的第8章); ———增加了“离子色谱法”(见第5章)。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC387)提出并归口。 本文件起草单位:中国测试技术研究院生物研究所、上海市质量监督检验技术研究院有限公司、 安徽皖仪科技股份有限公司、四川省食品检验研究院、上海海关动植物与食品检验检疫技术中心、赛默 飞世尔科技(中国)有限公司、合肥市食品药品安全检验检测中心、安庆师范大学、遵义市产品质量检验 检测院(遵义市综合检验检测中心)、四川省分析测试服务中心、深圳市古方中药饮片有限公司、兰州百 源基因技术有限公司。 本文件主要起草人:刘明东、朱伟、许洋、刘洋、李椤颢、王海燕、宋政轩、樊东生、冯德建、姜凯、 朱玉琳、王小平、邹燕、韩春霞、龚婷婷、孟亚辉、郑洪国、汪海宣、魏强、许倩、汪德进、罗进、王孝彦、张剑、 袁付明、车团结、张莹、戴继扬。 本文件于2021年首次发布,本次为第一次修订。 ⅢGB/T40980—2026生化制品中还原糖的测定 1 范围 本文件描述了生化制品中D-甘露糖、D-核糖、L-鼠李糖、D-乳糖、D-麦芽糖、D-葡萄糖、D-半乳 糖、D-木糖、L-阿拉伯糖、L-岩藻糖10种还原糖的柱前衍生高效液相色谱和离子色谱测定方法。 本文件适用于含糖胃蛋白酶、改良Y培养基、葡萄糖肉汤培养基、缓冲动力-硝酸盐、木糖明胶培养 基生化制品中D-甘露糖、D-核糖、L-鼠李糖、D-乳糖、D-麦芽糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、L-阿 拉伯糖、L-岩藻糖的含量测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 柱前衍生高效液相色谱法 4.1 原理 试样中的还原糖经沸水提取,与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化反应,反应液经三氯甲烷 萃取后,由高效液相色谱仪测定,用外标法定量。 4.2 试剂或材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,实验用水应符合GB/T6682中一级水的要求。 安全提示:三氯甲烷和甲醇属于挥发性有毒试剂,正己烷属于挥发性易燃试剂,必须在通风橱中进 行操作;盐酸和氢氧化钠溶液具有强腐蚀性,操作时需佩戴防护手套和口罩,若不慎接触皮肤,应立即用 大量清水冲洗。 4.2.1 试剂 4.2.1.1 磷酸二氢钾(KH2PO4)。 4.2.1.2 氢氧化钠(NaOH)。 4.2.1.3 亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O]。 4.2.1.4 乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]。 4.2.1.5 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(C10H10N2O,PMP)。 4.2.1.6 浓盐酸(HCl)。 1GB/T40980—20264.2.1.7 三氯甲烷(CHCl3)。 4.2.1.8 甲醇(CH3OH)。 4.2.1.9 乙腈(CH3CN):优级纯。 4.2.1.10 三乙胺(C6H15N)。 4.2.1.11 正己烷(C6H14)。 4.2.2 标准品 10种还原糖化合物:纯度≥99%,详细信息见附录A,或标准样品/标准物质。 4.2.3 溶液配制 4.2.3.1 亚铁氰化钾溶液(106g/L):称取106.0g亚铁氰化钾,用水溶解并定容至1000mL,摇匀。 4.2.3.2 乙酸锌溶液(220g/L):称取220.0g乙酸锌,用水溶解并定容至1000mL,摇匀。 4.2.3.3 0.5mol/L1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生溶液:称取87.1gPMP衍生化试剂,用甲醇 溶解并定容至1000mL,摇匀。 4.2.3.4 1.0mol/LNaOH溶液:称取40.0g氢氧化钠,用水溶解并定容至1000mL,摇匀。 4.2.3.5 1.0mol/LHCl溶液:取83.2mL浓盐酸,缓慢加入约800mL水中,冷却后加水定容至 1000mL,摇匀。 4.2.3.6 单一标准储备液(10mg/mL):分别称取还原糖标准品各约1.0g(精确至0.1mg),用水溶解并 定容至100mL,配制成质量浓度均为100mg/mL的单一标准储备液,于0℃~4℃密封保存,有效期 3个月。 4.2.3.7 混合标准储备液(500mg/L):分别吸取0.50mL各单一标准储备液于同一100mL容量瓶 中,用水稀释并定容至刻度,配制成质量浓度均为500mg/L的混合标准储备液,现配现用。 4.2.3.8 系列标准工作溶液的配制:分别移取0.10mL、0.20mL、0.40mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL混 合标准储备液于不同容量瓶中,用水定容至10mL,混匀,配制成质量浓度均为5.000mg/L、 10.00mg/L、20.00mg/L、50.00mg/L、100.0mg/L和200.0mg/L的系列标准工作溶液,现配现用。 4.2.4 材料 0.45μm有机相滤膜。 4.3 仪器设备 4.3.1 高效液相色谱仪:配紫外检测器(UV)或二极管阵列检测器(DAD)。 4.3.2 分析天平:分度值0.01mg和0.0001g。 4.3.3 超声波提取器:功率250W,工作频率40kHz。 4.3.4 离心机:离心力≥2800g。 4.3.5 酸度计:精度为0.01级,pH测定范围为0~14。 4.3.6 恒温水浴装置。 4.3.7 涡旋混匀器。 4.3.8 电动粉碎机。 4.4 试验步骤 4.4.1 样品制备 取代表性样品至少50g,液体样品需充分混匀后直接使用,固体样品则用电动粉碎机进行粉碎(过 2GB/T40980—2026